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                顯微鏡照明光路系統的調整方法

                2016-03-15技術資料

                為了使顯微鏡的視野能受到均勻而又充分的照明,在顯』微鏡初次安裝和調試時,就必須把照明光路系統調整好,這是正確使用顯微鏡,並獲得Ψ正確、可*結果的重要手段和最基本的要求。此外,正確掌握照明光路系統的調整,是使用顯微鏡過程中更換光源燈泡後所必經的步驟,也是在日常使用過程中不時地檢驗顯微鏡性能的必要手段。顯微鏡照ω明光路系統的調整主要有以下4項內容:
                ??? (1) 照明光↑源燈室在顯微外的初步調整
                ???? ① 首先將燈室的外殼≡打開,壓彈簧夾子將鹵素燈泡裝入插座中,安裝時避免手指直接接觸燈泡(可用「柔軟的布或紙隔住),以免燈泡上留有指紋等臟物,影響燈※泡的使用壽命。
                ???? ② 把燈室擺在桌面上,接通電源後,用專用的螺絲刀調節燈的調焦旋鈕孔(標有“←→”),使燈絲投影在1-2m外的墻上,將燈▅絲成像調至清晰;然後調節燈的高低位置調節絲孔(標有“──”),使燈絲位置高低適當;再調節Ψ燈的左右位置調節螺絲孔(標有“──”),使燈絲左右位置合適。
                ????(2) 光源發光╲體(燈絲)在顯微鏡內位置的檢驗和校正目的是為了把發光體的像端端正正①地調入物鏡的視域範↘圍內,從光源的角度去確保顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明,這是調整庫勒照明系統的前提條件。需要的基本ω 工具:對中望遠鏡購置顯微鏡時已配備。
                ???? ① 拔掉燈庫內的毛玻璃套筒,把燈室裝回顯微鏡上;
                ??? ?② 選用10×物鏡,開亮光源程序找樣品並調焦清晰,再換用40×物鏡把樣品調焦清 晰(40×物鏡可以看清燈絲的全貌);
                ???? ③ 把聚光鏡的孔徑光闌和♀視場光闌均開到最大;
                ???? ④ 拔掉其中◣一個目鏡,換上對中望遠鏡,抓住白色部⊙分,另一手伸縮黑色接目鏡,就可∮在視野中看到燈絲像;
                ???? ⑤ 如燈絲位置不合適,調“──”孔,把燈絲像沿水平方向調好,調“──”孔,把絲¤像沿垂直方向調好,直至將燈絲像調至剛好充滿物鏡孔徑的光圓ㄨ像;
                ???? ⑥ 調整完畢後,將毛玻璃套筒插回原位,拔掉對中望遠鏡,換回目鏡作下一步調整。以上所述照明光源燈室在顯微鏡外的調整和光源發光體在顯微鏡內位置的校驗,只需在顯微鏡初次安裝◥調試及更換燈泡時進行,平時使用顯微鏡時不能隨意亂調亂動。萬一調亂時』,可按上述步驟調回原狀。
                ??? (3) 庫勒照明(Kohler)系統的正確調整顯微△鏡的正確調試,主要工作之一是照明光路系統的調整,而其中的關鍵是庫勒照明系統的調整。對於每一位使用顯↙微鏡的人員,特別是作顯微照像的人員來說,應該對庫勒照明系統的原理及其調整步驟有一定的了解和掌握,才能充分發∩揮顯微鏡應有的功能,(景通儀器),拍出來的照片才能在效果上比較一致而又完善。庫勒照明系統」的原理簡單來說就是:光源發光體上任意一點發出的光,可以照明顯微鏡的視域範【圍,而光源發光體上每一點所發出的光匯集起來,在顯微鏡的視域中就實現了非常充分而又均勻的照明。調整庫勒照明系統的目的,是為了使所觀察的視域能獲得均勻而又充分的照明,防止雜散光對照像系統▽造成影響或幹擾,以免照像時在底◎片形成灰霧。高調整庫勒照明系統的必要部件:視場光闌、可進行合軸調整的聚光鏡系統。
                ???? ① 選用10×物鏡和10×目鏡;
                ???? ② 把聚光鏡前端透鏡擺進光路中,孔徑光闌調至適︻中的位置上(不大不小),再把聚光鏡升到最頂的位置上,聚光鏡轉盤調至明視野“J”位置;
                ???? ③ 把視場光闌〗調至最小(0.1);
                ???? ④ 載物臺上放上已封片的生物樣品,開亮光源,調焦清晰;
                ???? ⑤ 視域中會□ 出現一個局部照明的區域或亮斑,這是視場光闌的模糊像,在其中可△以清晰地看到樣品的細節;在它之外是較暗的視域,不一定能把樣品的細節看得清楚;
                ??? ?⑥ 把聚光鏡微微@ 地向下調,使視野中的亮斑逐漸收小,慢慢變成一個清晰的多邊形象,這便是視場光闌的清晰像;
                ???? ⑦ 一般情況下,多邊形∴象並不在視域中央,需要調整聚光鏡的一對調中螺絲,把視場光闌多邊形的像調至▲中央位置;
                ???? ⑧ 逐漸開大視場光闌,使多▓邊形象成為視域的內接多邊形,進一步核對調中的狀況,如對中不夠理想,繼續微微調對中螺≡絲;
                ???? ⑨ 將視場光闌稍為再微微開大一些,使它的多邊形象恰◥好消失在視域的邊緣上,至此,(景通儀器),庫勒照明系統調整完畢。 庫勒照明系統調整好以後,整個視域照明均※勻,拍攝的顯微照片明亮清晰,反差正常。在日後使用過程中應特別註意: a. 視場光闌不可任意開大,但可隨物鏡倍數的◥增大而將視場光闌收小,隨物鏡倍數的減小而開大; b. 聚光鏡的高低位置不準↙亂調,否則會破壞已調整好的庫勒照明系統; c. 使用10×以下物鏡時要將聚光鏡前端透鏡擺出光路外,使用10×或10×以上物≡鏡時要將前端透鏡擺入光路中; d. 關於物鏡倍數與視場光闌大小配合問題,在實際使用過程中,作為一般∞觀察不一定要收小或開大視場光闌,但作顯微照相時,為∮了避免雜散光線對照相系統的幹擾,以便能拍攝到較完善的照片,則應√在使用每一個倍數的物鏡時,把視♀場光闌調節到正好消失於所觀察的視域邊上,這是ξ 比較繁復的工作,但又非做不可。較為簡便的方法是把與各◢個倍數物鏡相對應的視場光闌事先調整好,並作好記號,以後使用時根據記號直接調♀至相應的位置。
                ??? (4) 孔徑光闌的正確使用由於聚光鏡的孔徑光闌可以影響顯微鏡的分辨率,使用時應掌握正確的使用方法。過去由於對孔徑光闌的ξ認識不足,往往把它當作是調節視野亮度的工具。雖然調節孔徑光闌↘在一定程度上可以改變視野的亮度,但會直接影響成像的反差、對比度及分辨率,在使用過程中應盡可能避免。為了發揮聚光鏡孔徑光闌的作用,以便在∮觀察時,尤其在作顯微照相時獲得最佳分辨率,在每換用一個倍數的物鏡時∏,在樣品調焦清晰後,需要調█節孔徑光闌,使它的大小正好等於所用物鏡數值孔徑(物鏡孔徑像)的2/3 。 調整方法是用對中望遠鏡對焦於視野中黑色相差環上,調節孔徑光闌,可以看到一個多邊形的孔徑光闌像,然後調到▓等於物鏡孔徑像的2/3,即介於黑色相差環外與圓形視域內╱之間。為方便起見,可把與各倍數物鏡相∑對應的孔徑光闌預先調整好,並作好標記,以免每次使用都要』重新調整。